Aloe Land

Этот метод называется методом изотопных индикаторов. Изотопы в химическом отношении неотличимы от обычных атомов, но их можно отличить физическими методами. Радиоактивный углерод в образовавшихся соединениях можно обнаружить, например, с помощью счетчика Гейгера — Мюллера. С введением изотопного анализа в биохимию стало возможным различить «механизмы» и субстрат, вещество самого растения и питательное вещество. Произошло проникновение в сокровенные глубины обмена веществ. «Излучающий» изотоп показывает путь, которым идет соединение, включившее в себя этот изотоп.

Кальвин применил эту технику совместно с хроматографическим методом, чтобы проследить путь углерода при фотосинтезе. Важнейшим вспомогательным методом стала для него так называемая бумажная хроматография (разделение веществ на бумаге). Этот метод заключается в том, что смесь подлежащих разделению веществ (например, листовой экстракт) наносят на специальную бумагу в виде точки или штриха и с помощью органических растворителей разделяют на составляющие вещества. Полученную хроматограмму покрывают рентгеновской пленкой. На тех местах, где имеется радиоактивное излучение, происходит почернение фотоэмульсии. Это участки, на которых на хроматографической бумаге находятся радиоактивные вещества. В результате работы, длившейся более десяти лет, Кальвину и его сотрудникам удалось определить все почерневшие места на рентгеновской пленке, то есть идентифицировать все продукты фотосинтеза, которые были выделены хроматографически.

Последовательно сокращая время ассимиляции 14С02 — до минут, секунд и, наконец, до долей секунды, — Кальвин добился того, что радиоактивным осталось лишь одно соединение. Это 3-фосфоглицериновая кислота, в конечном счете, первый обнаруживаемый продукт фотосинтетической ассимиляции двуокиси углерода.